Bacillus licheniformis
NADH+H
+
+O
2
→ NAD
+
+ H
2
O
2
凍結乾燥物
50 units/mg 以上（タンパク質1 mg当りの国際単位）
pH7.0、30℃において1分間に基質 NADH 1μmolを酸化するに要する酵素量を1 unitとする。
5℃以下で保存すれば、12ヶ月間活性の低下は殆ど認められない。室温でも少なくとも1週間は安定である。なお、凍結保存（−20℃）すれば、長期間安定に保存できる。
Catalase活性は認められないが、完全な消去が必要な場合はアジ化ナトリウムを10mM 程度共存下で使用する。
分子量
約 240,000 Da
至適pH
6.5〜7.5
至適温度
45℃
pH安定性
7.0〜8.5
熱安定性
30℃以下 （pH7.5, 10 min）（但し、0.1% Bovine serum albumin共存下では安定性は10℃程度改善され、40℃以下となる）
補酵素
FAD、本酵素は本来FAD酵素であるが、反応液中にFADを別途に30μM程度共存させることにより活性は20〜30倍に上昇する。
基質特異性
NADH及びNADPHの何れにも作用するが、反応液中にFAD（約30μM）を添加することによってNADHに対する活性は20〜30倍に上昇するのに比し NADPHに対する活性は2〜3倍の上昇に過ぎず、FAD存在下での反応ではNADPHに比べNADHに対し約10倍の活性を示す。
Km値
3.2×10
-5
M （NADH）
6.7×10
-6
M （FAD）
基質NADHの減少に伴う340 nm での吸光度の減少を測定して算出する。光路 1 cm のキュベット中に 250 mM リン酸緩衝液（pH7.0） 0.6 ml、2 mM NADH 0.3 ml、1 mM FAD 0.1 ml、及び蒸留水 1.9 mlを加え、30℃に平衡化後、約 0.2 unit/mlの酵素液 0.1 ml を加えて直ちに反応を開始し、反応液からNADH及び酵素液を蒸留水で置き換えた溶液を対照として 340 nm での初期吸光度減少（反応開始後30〜90秒間の1分間のΔA340）を読み取り、活性は計算式：
unit/キュベット
＝ΔA340/min×3÷6.22
3
= キュベット中の液量（ml）
6.22
= NADHのミリモル分子吸光係数
による算出する。なお、酵素の希釈としては 0.1%Bovine serum albuminを含む緩衝液（例えば30 mM リン酸緩衝液、pH7.5）を使用する。
特許： 特公平 07-108219
5 units, 25 units
